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- 细胞科普——细胞科普手册
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- 发布时间：2023-05-11
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- 技术文章|细胞培养中常用的消毒方法
- 细胞培养最重要的就是保持无菌环境，实验室无菌、培养液无菌、耗材无菌，为了给细胞创造良好的无菌环境，让细胞生长的更加安心无忧，小编整理了细胞培养过程中消毒灭菌的方法，供大家参考。 1房间消毒 1.1紫外线消毒 紫外线消毒是一种物理消毒方法，辐照能量低，能杀灭直接照射到的微生物，包括细菌繁殖体、芽孢、分支杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等，凡是被上述微生物污染的表面、水和空气均可采用紫外线消毒。 紫外线消毒的原理主要是用紫外光摧毁微生物的遗传物质核酸（DNA或RNA）使其不能分裂复制。除此之外，紫外线还可引起微生物其他结构的破坏。微生物不能复制繁殖，就会自然死亡，从而达到消毒的效果。 紫外线消毒的适宜温度范围是20~40℃，温度过高或过低均会影响消毒效果，同时紫外线的消毒效果与紫外灯的辐射强度和照射剂量呈正相关。辐射强度会随距离增加而降低，照射剂量和照射时间呈正比。因此紫外灯与被照射物的距离和照射时间要适合。离地面2米的30W紫外灯可照射9平方米房间，每天照射2~3小时，期间可间隔30分钟。灯管离地面2米以外要延长照射时间，2.5米照射效果较差。紫外灯照射工作台的距离不应超过1.5米，照射时间30分钟为宜。 紫外线对微...
- 发布时间：2023-08-09
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- 技术文章|血清必须热灭活吗？
- 血清热灭活是许多细胞培养者感兴趣的话题，许多科研的小伙伴拿到一瓶全新的血清，总会犹豫血清究竟要不要进行灭活处理、血清灭活要怎样操作、在什么情况下要对血清进行灭活等等，关于这些疑问，小编今天就为大家做一个详细的解答。 一、什么是热灭活？ 一般情况下，血清的热灭活是在血清全部解冻后，置于56℃水浴中30分钟进行处理。如果为了更好的保留血清的营养成分，减少热灭活对血清的损伤，可以将血清置于40℃水浴中20分钟进行热灭活。 二、血清为什么要热灭活？ 很多人认为，血清热灭活是为了消灭血清中的细菌、病毒等微生物，其实不然，一瓶合格的血清，在生产过程中，会严格把控血清中微生物的指标。一般情况下，用户买到的血清，都是无菌的，可以在解冻后直接进行使用。 对血清进行热灭活处理，实际是为了使血清中的补体失活。补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中，不耐热，活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应。可被抗原-抗体复合物或微生物所激活，导致病原微生物裂解或被吞噬。 三、胎牛血清需要灭活吗？ 胎牛血清是来自未分娩的胎牛，经心脏穿刺采血，后经其他步骤制备而来的。这个阶段的血清中，未形成完整的补体系统，不会真...
- 发布时间：2023-08-09
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- 不要沉淀，要美观！——浅谈血清沉淀
- 在细胞培养中，血清的品质在一定程度上可以影响到细胞培养的成败，如果血清中出现沉淀，不免会让人担心细胞会不会因为沉淀而出现问题。所以，关于血清沉淀，小编和大家分享以下几点内容。 一、血清沉淀物到底是什么？ 常见的血清沉淀有以下几种： 纤维蛋白：纤维蛋白是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1~2mm，可以用肉眼观察到。由于在生产过程中，血清采集、过滤和罐装处理都是在低温条件下快速完成的，血清中的纤维蛋白原处于溶解状态，但在解冻后，血清中的纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。 磷酸钙：常见的一种沉淀物，会造成血清浑浊，并且在37℃培养的时候会增加，这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此通常会被误认为是微生物污染。 其他：胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质也是血清中出现沉淀的常见原因。 二、血清沉淀物对细胞培养有什么影响？ 血清出现沉淀是血清的正常特性，经过我们的试验以及细胞培养经验表明，血清沉淀物不会影响细胞培养。 三、血清沉淀物是不是污染？ 血清沉淀物中，磷酸钙往往会被误认为是微生物污染，特别是在37℃条件下培养后，...
- 发布时间：2023-08-09
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- 血清知识解读，它来了！
- 上世纪50年代，科研人员已经把血清添加到培养基中，并且取得了良好的培养效果，但是由于血清成分十分复杂，直至今天，血清中的所有成分仍未完全分析出来，并且血清成分及含量会随动物性别、年龄、生理条件的不同而发生改变。现阶段血清中已明确检测出含有各种蛋白质、多肽、生长因子、氨基酸、脂类、碳水化合物、无机物、维生素等，这些成分为细胞的正常生长提供了基本的营养物质。 一、血清的分类 血清有多种类型，以牛血清为例，可以划分为：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清。 胎牛血清取自剖腹产的健康胎牛； 新生牛血清取自出生14h内未进食的新生牛； 小牛血清取自出生6月龄以内的健康小牛（企业内控标准）； 成牛血清取自健康的成牛（企业内控标准）。 因胎牛未接触外界，血清中抗体、补体等对细胞有害成分最少，故胎牛血清品质最高。 二、血清的保存 长期保存建议存放于-15~-20℃环境中，若无法一次性将1瓶中的血清全部使用完毕，建议将血清分装到一次性能够用完的小瓶中，再进行冷冻保存，避免出现反复冻融现象。 血清在放入冷冻环境前，建议瓶中预留一定的体积空间，避免血清冻结后体积增大，撑破包装瓶，形成污染...
- 发布时间：2023-04-27
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- 细胞污染及防治措施
- 在细胞培养实验中，流传着一个词语，叫做“谈污色变”，污染对于每一位细胞培养者来说，都是灾难，它让我们的努力都付诸东流，所以，要想细胞正常生长，实验圆满完成，我们要先了解常见的细胞污染有哪些，并且针对这些污染要做出有效的防治措施。 一、细菌污染 细胞被细菌污染后，通常情况下，细胞培养液会变黄，变浑浊，镜下观察可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮。常见的污染细菌为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌，这两种细菌对青霉素和链霉素较为敏感，所以细胞轻度污染时，建议用双抗（青链霉素）清洗处理，一般情况下，一周左右细胞可恢复正常；重度污染时，建议消杀后丢弃。 二、真菌污染 污染细胞的真菌多为烟曲霉、黑曲霉、孢子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌，培养液不会出现颜色变化，但时间长了以后会有菌丝或者菌团漂浮。显微镜下呈现树枝状或者串珠状。细胞真菌污染后，较难根除，建议消杀后丢弃。 三、支原体污染 细胞被支原体污染后，细胞形态不会发生明显变化，培养基也不会变浑浊，支原体可以和细胞共同生存，细胞不会死亡，但支原体会抑制细胞生长，影响细胞正常的代谢功能。需要特殊的检测方法来判断细胞是否被支原体污染，常用的方法有：DNA荧光染色法、支原体培养法、PCR法等。...
- 发布时间：2023-04-27
